熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。熒光顯微鏡利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡的使用方法
1、用窗簾遮蔽光線，關(guān)閉房間內(nèi)的電燈，除去熒光顯微鏡的防塵罩，確保熒光顯微鏡燈室通風(fēng)良好、無(wú)遮蓋。裝上汞燈燈箱，并轉(zhuǎn)動(dòng)燈箱卡圈上的撥桿，將燈箱與鏡臂連接。
2、將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座，再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。
3、打開(kāi)熒光顯微鏡電源開(kāi)關(guān)，電壓表顯示出電源電壓，如電源電壓波動(dòng)不大于額定電壓值的5%，即可按下啟動(dòng)開(kāi)關(guān)點(diǎn)燃汞燈，如因天氣太冷或電壓不穩(wěn)定等原因，一次啟動(dòng)未點(diǎn)燃汞燈，可以多按幾次。待超高壓汞燈弧光達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)并達(dá)到Zda發(fā)光效率，即可開(kāi)始工作。
4、燈泡的調(diào)中：
①任選一塊標(biāo)本放在熒光顯微鏡載物臺(tái)上。
?、谵D(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路，轉(zhuǎn)動(dòng)濾色片組轉(zhuǎn)換手輪，將紫光(V)或藍(lán)光(B)或綠光(G)激發(fā)濾色片組轉(zhuǎn)入光路，并將25熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路。
?、壅{(diào)節(jié)粗微調(diào)手輪，將標(biāo)本像調(diào)焦清晰。
④前后推動(dòng)垂直照明器右邊的聚光鏡調(diào)焦推桿，使視場(chǎng)光欄成像清晰，轉(zhuǎn)動(dòng)視場(chǎng)光欄撥桿將視場(chǎng)光欄收小，調(diào)節(jié)視場(chǎng)光欄調(diào)中螺釘使視場(chǎng)光欄居中，然后再將視場(chǎng)光欄開(kāi)至Zda。
?、蒉D(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路，前后調(diào)節(jié)燈箱上的聚光鏡撥桿，使汞燈的弧光在視場(chǎng)內(nèi)成像清晰。
⑥調(diào)整燈箱上的燈泡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘，使汞燈的弧光居中。
⑦調(diào)整反光鏡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘，使光源的反射像與汞燈的弧光分開(kāi)。
⑧轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路，此時(shí)視場(chǎng)照明均勻。
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